2658-6533Научные результаты биомедицинских исследований2658-653310.18413/2658-6533-2019-5-3-0-81755Клиническая медицинаЭкспрессия мРНК IL-2, IL-10, IL-12 и IL-23 в децидуальной ткани у пациенток с неразвивающейся беременностью и самопроизвольными выкидышами ранних сроковIL-2, IL-10, IL-12 and IL-23 mRNA expression in the decidual tissue in patients with missed and spontaneous abortions in early pregnancyЛебедеваОльга ПетровнаLebedevaOlga P.safonova2@yandex.ruИвашкевичАлена НиколаевнаIvascheviciAliona N.alionka_iv@yahoo.com20195300

Актуальность: Невынашивание является одним из самых частых осложнений I триместра беременности и составляет около 15% среди всех диагностированных случаев беременности. Однако иммунные причины невынашивания изучены недостаточно. Цель исследования: Изучить особенности экспрессии мРНК IL-2, IL-10, IL-12 и IL-23, участвующих в дифференцировке Th1, Treg и Th17, в децидуальной ткани пациенток со спорадическим прерыванием беременности в I триместре (неразвивающейся беременностью и самопроизвольными выкидышами) на сроке 6-10 недель. Материалы и методы: 34 пациентки с неразвивающейся беременностью, 34 пациентки с самопроизвольными выкидышами и 57 пациенток с прогрессирующей беременностью (контрольная группа), поступивших для проведения медицинского аборта, были обследованы на сроке 6-10 недель беременности. Критериями исключения были: наличие тяжелых экстрагенитальных заболеваний, антифосфолипидного синдрома, эндокринных причин невынашивания, анатомических аномалий матки, подтвержденных хромосомных аномалий эмбриона и плода. Материалом для исследования являлась децидуальная ткань, полученная при выскабливании полости матки. Экспрессию мРНК IL-2, IL-10, IL-12 и IL-23 определяли с помощью обратнотранскриптазной количественной ПЦР. Статистический анализ проводили в программе Statistica 13.2 (Statsoft, USA) c использованием критерия Манна-Уитни. Результаты: Экспрессия мРНК IL-12 у пациенток с сампроизвольными выкидышами ранних сроков была достоверно выше, чем у пациенток контрольной группы. У пациенток с неразвивающейся беременностью экспрессия мРНК IL-12 достоверно не отличалась от контрольной группы.  IL-12 обеспечивает дифференцировку Th1-лимфоцитов и стимулирует натуральные киллеры. Экспрессия мРНК IL-2, IL-10 и IL-23 в децидуальной ткани не имела достоверных различий с группой контроля как у пациенток с неразвивающейся беременностью, так и с самопроизвольными выкидышами ранних сроков. IL-2 обеспечивает дифференцировку регуляторных Т-лимфоцитов (Treg). IL-10 является противовоспалительным цитокином, секретируемым преимущественно Th2-лимфоцитами и Treg, и ингибирующим дифференцировку Th17-лимфоцитов. IL-23 обеспечивает дифференцировку Th17. Заключение: Таким образом, у пациенток c самопроизвольными выкидышами в децидуальной ткани наблюдается увеличение экспрессии мРНК IL-12, обеспечивающего дифференцировку Th1 лимфоцитов, по сравнению с контрольной группой. Так как и у пациенток с неразвивающейся беременностью, и с самопроизвольными выкидышами не было выявлено достоверных различий в экспрессии в децидуальной ткани мРНК IL-2, IL-10 и IL-23, регулирующих баланс Treg/Th17, необходимы дальнейшие исследования для оценки роли данных цитокинов в патогенезе невынашивания беременности.

Background: Miscarriages are one of the most common complications of the first term of pregnancy. The rate of early miscarriages is about 15% of all diagnosed cases. Meanwhile, immune causes of miscarriages are not well understood. The aim of the study: To study the expression of IL-2, IL-10, IL-12 and IL-23 mRNAs, participating in differentiation of Th1, Treg and Th17, in the decidua of patients with sporadic missed and spontaneous abortions at 6-10 weeks of gestation. Materials and methods: 34 patients with missed abortions, 34 patients with spontaneous abortions and 57 patents with progressive pregnancy (control group), admitted for medical abortion, were examined at 6-10 weeks of gestation. Patients with severe extragenital diseases, antiphospholipid syndrome, endocrine disorders, anatomic abnormalities of the uterus, сhromosomal abnormalities of embryo and fetus were excluded from the research. The decidual tissue was obtained by uterine abrasion. IL-2, IL-10, IL-12 and IL-23 mRNA expression was detected by reverse-transcription qPCR. Statistical analysis was performed by Mann-Whitney test using Statistica 13.2 (Statsoft, USA). Results: The expression of IL-12 mRNA was significantly higher in the decidua of patients with spontaneous abortions compared with the control group. The expression of IL-12 in patients with missed abortions didn’t have significant differences with the control group. IL-12 provides differentiation of Th1-lymphocytes and stimulates NK-cells. The levels of IL-2, IL-10 and IL-23 in the decidua of patients with missed and spontaneous abortions had no significant differences compared with the control group. IL-2 provides differentiation of Treg. IL-10 is anti-inflammatory cytokine, secreted predominantly by Th2 and Treg, and inhibiting Th17 differentiation. IL-23 provides differentiation of Th17. Conclusion: Thus, patients with spontaneous abortions have higher expression of IL-12 mRNA, providing differentiation of Th1 lymphocytes, in the decidual tissue compared with the control group. As patients with missed and spontaneous abortions don’t have significant differences with the control group in mRNA expression of IL-2, IL-10 and IL-23, regulating Treg/Th17 balance, further investigations should be performed for estimating the role of these cytokines in pathogenesis of miscarriages. 

невынашиваниенеразвивающаяся беременностьсамопроизвольный выкидышдецидуальная тканьэндометриймРНКIL-2IL-10IL-12IL-23miscarriagemissed abortionspontaneous abortiondecidual tissueendometriummRNAIL-2IL-10IL-12IL-23

Работа выполнена при поддержке гранта Президента РФ МД-2326.2017.7 «Разработка молекулярных методов индивидуального прогнозирования невынашивания беременности ранних сроков».

Список литературыInflammosome in the human endometrium: further step in the evaluation of the “maternal side” / S. D'Ippolito [et al.] // Fertility and sterility. 2016. Vol. 105(1). P. 111-118. DOI: https://doi.org/10.1016/j.fertnstert.2015.09.027Th1/Th2/Th17 and regulatory T-cell paradigm in pregnancy / S. Saito [et al.] // American journal of reproductive immunology. 2010. Vol. 63(6). P. 601-610. DOI: https://doi.org/10.1111/j.1600-0897.2010.00852.xSharma S. Natural killer cells and regulatory T cells in early pregnancy loss // The International journal of developmental biology. 2014. N 58. P. 219. DOI: 10.1387/ijdb.140109ssСубпопуляции Т-лимфоцитов эндометрия в патогенезе невынашивания беременности ранних сроков / О.П. Лебедева [и др.] // Проблемы репродукции. 2018. Т. 24, N 1. С. 82-86. DOI: 10.17116/repro201824182-86Kalinski P. Regulation of immune responses by prostaglandin E2 // The Journal of Immunology. 2012. Vol. 188(1). P. 21-28. DOI: 10.4049/jimmunol.1101029The MIQE guidelines: minimum information for publication of quantitative real-time PCR experiments / S.A. Bustin [et al.] // Clinical chemistry. 2009. Vol. 55(4). P. 611-622. DOI: 10.1373/clinchem.2008.112797Pfaffl M.V. Quantification strategies in real-time PCR. In: S.A. Bustin, ed. A-Z of quantitative PCR. La Jolla: Int. University Line; 2004. P. 87-112.Хаитов Р.М., Ярилин А.А., Пинегин Б.В. Иммунология: атлас. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2011.Low levels of circulating alpha-1 antitrypsin are associated with spontaneous abortions / T. Madar [et al.] // The Journal of Maternal-Fetal and Neonatal Medicine. 2013. Vol. 26(18). P. 1782–1787. DOI: https://doi.org/10.3109/14767058.2013.801955Maternal serum levels of pro-inflammatory cytokines in missed and threatened abortion / R. Paradisi [et al.] // American Journal of Reproductive Immunology. 2003. Vol. 50(4). P. 302-308. DOI: https://doi.org/10.1034/j.1600-0897.2003.00065.xTian C.-F., Kang M.-H. Common stress and serum cortisol and IL-12 levels in missed abortion// Journal of Obstetrics and Gynaecology. 2013. Vol. 34(1). P. 33-35. DOI: https://doi.org/10.3109/01443615.2013.830089Abnormal first trimester serum interleukin 18 levels are associated with a poor outcome in women with a history of recurrent miscarriage / R. Wilson [et al.] // American Journal of Reproductive Immunology. 2004. Vol. 51(2). P. 156-159. DOI: https://doi.org/10.1046/j.8755-8920.2003.00126.xQuestioning the Th1/Th2 paradigm in reproduction: peripheral levels of IL-12 are down-regulated in miscarriage patients / A.C. Zenclussen [et al.] // American Journal of Reproductive Immunology. 2002. Vol. 48(4). P. 245-251. DOI: https://doi.org/10.1034/j.1600-0897.2002.01136.xEvaluation of peripheral blood NK cell subsets and cytokines in unexplained recurrent miscarriage / H.A. Rad [et al.] // Journal of the Chinese Medical Association. 2018. Vol. 81(12). P. 1065-1070. DOI: https://doi.org/10.1016/j.jcma.2018.05.005Role of inflammatory mediators in patients with recurrent pregnancy loss / C. Comba [et al.] // Fertility and sterility. 2015. Vol. 104(6). P. 1467-1474. DOI: https://doi.org/10.1016/j.fertnstert.2015.08.011The role of T-helper cytokines in human reproduction / K.J. Lim [et al.] // Fertility and sterility. 2000. Vol. 73(1). P. 136-142. DOI: https://doi.org/10.1016/S0015-0282(99)00457-4Investigation of systemic inflammatory response in first trimester pregnancy failure / J. Calleja-Agius [et al.] // Human reproduction. 2011. Vol. 27(2). P. 349-357. DOI: https://doi.org/10.1093/humrep/der402Cytokine production by maternal lymphocytes during normal human pregnancy and in unexplained recurrent spontaneous abortion / R. Raghupathy [et al.] // Human Reproduction. 2002. Vol. 15(3). P. 713-718. DOI: https://doi.org/10.1093/humrep/15.3.713Hadinedoushan H., Mirahmadian M., Aflatounian A. Increased Natural Killer Cell Cytotoxicity and IL-2 Production in Recurrent Spontaneous Abortion // American Journal of Reproductive Immunology. 2007. Vol. 58(5). P. 409-414. DOI: https://doi.org/10.1111/j.1600-0897.2007.00524.xRezaei A., Dabbagh A. T-helper (1) cytokines increase during early pregnancy in women with a history of recurrent spontaneous abortion // Medical Science Monitor. 2002. Vol. 8(8). P. CR607-CR610.Deficiency of decidual IL-10 in first trimester missed abortion: a lack of correlation with the decidual immune cell profile / M. Plevyak[et al.] // American Journal of Reproductive Immunology. 2002. Vol. 47(4). P. 242-250. DOI: https://doi.org/10.1034/j.1600-0897.2002.01060.xCharacterization of the subsets of human NKT-like cells and the expression of Th1/Th2 cytokines in patients with unexplained recurrent spontaneous abortion / J. Yuan [et al.] // Journal of Reproductive Immunology. 2015. Vol. 110. P. 81-88. DOI: https://doi.org/10.1016/j.jri.2015.05.001Differences in cytokine expression and STAT3 activation between healthy controls and patients of unexplained recurrent spontaneous abortion (URSA) during early pregnancy / J. Cai [et al.] // PloS one. 2016. Vol. 11(9). P. e0163252. DOI: https://doi.org/10.1371/journal.pone.0163252Variations in T-helper 17 and regulatory T cells during the menstrual cycle in peripheral blood of women with recurrent spontaneous abortion / N. Sereshki [et al.] // International journal of fertility and sterility. 2014. Vol. 8(1). P. 59.Jasper M.J., Tremellen K.P., Robertson S.A. Reduced expression of IL-6 and IL-1α mRNAs in secretory phase endometrium of women with recurrent miscarriage // Journal of Reproductive Immunology. 2007. Vol. 73(1). P. 74-84. DOI: https://doi.org/10.1016/j.jri.2006.06.003Increased prevalence of T helper 17 (Th17) cells in peripheral blood and decidua in unexplained recurrent spontaneous abortion patients / W.-J. Wang [et al.] // Journal of Reproductive Immunology. 2010. Vol. 84(2). P. 164-170. DOI: https://doi.org/10.1016/j.jri.2009.12.003Th17 cells and related cytokines in unexplained recurrent spontaneous miscarriage at the implantation window / B. Saifi [et al.] // Reproductive BioMedicine Online. 2014. Vol. 29(4). P. 481-489. DOI: https://doi.org/10.1016/j.rbmo.2014.06.008