Изучение ишемического прекондиционирования - одно из перспективнейших направлений экспериментальной медицины. Исследование механизма этого феномена дало начало фармакологическому прекондиционированию. С клинической точки зрения прекондиционирование фармакологическими средствами выглядит предпочтительнее, так как технологически проще и лишено потенциальной опасности ишемических эпизодов для патологически измененных тканей.

Никорандил – производное никотинамида, состоит из остатка амида никотиновой кислоты и нитратной группы, поэтому обладает свойствами активаторов АТФ-зависимых  калиевых  каналов( К_АТФ-каналы) и органических нитратов [5, 6, 7, 8, 10]. Доминирующим эффектом высоких концентраций никорандила является укорочение потенциала действия и рефрактерного периода, т.е. влияние на противоаритмические факторы[6]. Известно, что применение никорандила в остром периоде ишемии миокарда значительно уменьшает частоту развития желудочковой тахикардии, оказывает эндотелиопротекторное и кардиопротекторное действие   на модели L-NAME индуцированного дефицита оксида азота [4,11].

Целью настоящего исследованияявлялось изучение вклада К_АТФ-каналов в реализацию   кардиопротекторного эффекта никорандила на модели коронарооклюзионного инфаркта миокарда у кроликов.

Материалы и методы.

Изучение выживаемости ишемизированного миокарда было проведено  на  42 -х лабораторных кроликах массой 2-2,5 кг Влияние никорандила  на размер зоны некроза проводили на модели коронароокклюзиионного инфаркта миокарда. Инфаркт миокарда воспроизводился на наркотизированных животных (хлоралгидрат 300 мг/кг), находящихся на управляемом дыхании, путем перевязки нисходящей ветви левой коронарной артерии на уровне нижнего края ушка левого предсердия (60 мин) с последующей реперфузией (90 мин). Поперечные срезы миокарда производили через каждые 0,8 см, начиная с уровня 0,8 см ниже места наложенной лигатуры. Срезы миокарда помещали в емкость содержащую фосфатный буфер (рН 7,4) и 1 мг/мл трифенилтетразолия хлорид для образования красного формазана [2,3]. Подсчет площадей интактного и некротизированного миокарда левого желудочка производили на каждом из четырех срезов с помощью попиксельного анализа в программе Adobe Photoshop 9.0.  Уровень Troponin I (TnI) определяли на иммунофлуоресцентном приборе Triage MeterPro (Biosite, США).

Дистантное ишемическое прекондиционирование осуществляли путем наложения жгута на верхнюю треть бедра на 10 минут, с последующей 20 минутной реперфузией и воспроизведением модели инфаркта на 60 минут.

Фармакологическое прекондиционирование осуществляли с помощью внутривенного введение в маргинальную вену уха кролика никорандила в дозе 1,8 мг/кг  («Коронель», производство ООО «ПИК-ФАРМА», Россия). С целью подтверждения роли К_АТФ-каналов в реализации кардиопротекторных эффектов никорандила, животным вводили глибенкламид (блокатор К_АТФ-каналы) в дозе 0,4 мг/кг. Ингибитор индуцибильной NО-синтазы аминогуанидин 100 мг/кг вводили внутривенно за 30 минут до введения никорондила [1,2,3].

Результаты и обсуждение

Моделирование коронарооклюзии с последующей реперфузией приводило к формировании зоны зоны некроза составляющей 27,3±1,2 %. Одновременно на 90 минуте реперфузии обнаружено увеличение уровня Тропонина I, значение которого составили 16,26±1,9 нг/мл.

Применение дистантного прекондиционирования приводит к снижению величины зоны некроза в 3 раза и предотвращения повышения уровня Тропонина I в 4 раза (таблица 1).

Использование никорандила в дозе 1,8 мг/кг за 30 минут до коронарооклюзионного инфаркта миокарда оказывало кардиопротективное действие, выражающееся в ограничении зоны некроза и уменьшении значении Тропонина I, соответственно, до 10,7±0,8% и 5,2±1,1 нг/мл (таблица 1).

Введение никорандила в дозе 1,8 мг/кг на фоне глибенкламида 0,4 мг/кг оказалось не эффективным и значение размеров зоны некроза и уровня Тропонина I не отличались от группы контроля (таблица 1). Аналогично глибенкламид  полностью предотвращал кардипротективный эффект дистантного прекондиционирования (таблица 1). Последнее указывает на общий механизм реализации кардиопротективного эффекта реализующийся с участием АТФ-зависимых калиевых каналов.

Предварительное введение аминогуанидина 100 мг/кг нивелировало на 50 % защитное действие никорандила в дозе 1,8 мг/кг и в меньшей степени (30%) предотвращало кардипротективные эффекты дистантного прекондиционирования (таблица 1). Это свидетельствует о том, что ингибирование iNOS аминогуанидином 100 мг/кг не в полной мере предотвращает реализацию «второго окна» прекондиционирования.

Таблица 1

Влияние никорандила (1,8 мг/кг) в/в и дистантного ишемического прекондиционирования  на  размер зоны некроза
 и уровнь Тропонина I  при острой коронарооклюзии (60 мин) с последующей реперфузией (90 мин)  у наркотизированных кроликов (M± m; в % от массы левого желудочка; n=6).

Table 1

The influence of nicorandil (1,8 mg/kg, I.V.) and the distant ischemic preconditioning on the size of the necrosis zone and the level
of Troponin I in a accute coronary occlusion (60 min.) with subsequent reperfusion (90 min.) in anesthetized rabbits (M± m; in %
of the mass of the left ventricle; n=6).

Примечание:  КО/реперфузия – коронарооклюзия нисходящей ветви левой коронарной артерии на уровне ушка (60 мин) с последущей реперфузией ( 90 мин); ДИП-дистантное ишемическое прекондиционирование  (10 мин) верхней трети бедра;

*р < 0,05 – в сравнении с контролем;